ENDO2023 | 「细胞免疫疗法」治疗1型糖尿病又有新进展

引言：2023年6月15日至18日，国际内分泌领域重要学术会议「2023年美国内分泌学会年会（ENDO）」于美国芝加哥隆重召开。会上有学者分享了题为《细胞免疫疗法治疗1型糖尿病》的研究报告。

目前该课题组研究了胰岛β细胞、具有抗原特异性并表达嵌合抗原受体（CAR）的调节性T细胞（Treg细胞），并在人源化小鼠模型中探索了它们治疗1型糖尿病（T1D）的潜在价值。

该研究是首次成功地 将具有抗原特异性的CAR-Treg细胞用于治疗十分接近人类疾病的T1D小鼠模型。并已经证实GAD65-CAR小鼠Treg细胞能够找到胰岛中特异性抗原并在体内增殖。

基于小鼠实验数据，研究人员相信具有抗原特异性的CAR-Treg细胞治疗胰岛β细胞将运用于人类T1D患者胰岛β细胞的恢复和重建。因而设计了该研究来观察存在于人胰岛的谷氨酸脱羧酶65KD异构体（GAD65）-CAR人Treg细胞在源于T1D患者致糖尿病性人细胞毒T淋巴细胞（CTLs）上的生物学行为，来证实抗炎GAD65-CAR-Treg细胞能够在体外抑制致糖尿病人CTLs攻击异源人胰岛。

研究描述

本研究首先从3名T1D患者的外周血中提取了人Treg细胞和人CTLs（CD4和CD8 T细胞）。这些Treg细胞中的一批用于生成GAD65-CAR-Treg细胞。接下来使GAD65-CAR-Treg细胞和天然Treg细胞表达GFP用于追踪它们。

另外，从因其他临床症状（比如癌症）行胰腺切除术的捐赠者收集胰腺组织。胰腺组织用标准胶原酶法分离胰岛。然后，在异源人胰岛存在时，GAD65-CAR-Treg细胞和天然Treg细胞与来源于T1D患者的活化的自体CTLs（CD4和CD8 T细胞）共同培养。

在培养期间，使用IncuCyte S3活细胞系统(Sartorius公司生产）每天监测GAD65-CAR-Treg细胞归巢和胰岛存活能力，并在7天周期结束时通过流式细胞仪评估CTLs抑制率。ELISA法检测上清液细胞因子。

研究发现，在异源人胰岛存在时，GAD65-CAR-Treg细胞归巢于胰岛，被活化，增殖并抑制致糖尿病性CTLs（CD4和CD8 T细胞）。

流式细胞术证实在胰岛微环境中抑制糖尿病性CTLs方面，GAD65-CAR-Treg细胞比天然Treg细胞更优。与天然Treg细胞相比，GAD65-CAR-Treg细胞有显著的高增殖能力（P＜0.04），更重要的是，GAD65-CAR-Treg细胞组的糖尿病性CTLs抑制率高于天然Treg细胞（P＜0.01）。

本文小结

这项工作为细胞免疫疗法用于在胰岛保留时直接逆转T1D或在需要胰岛替代时间接逆转T1D提供了依据。

撰文：廖占林  南平市第一医院

校审：田字格

廖占林

福建医科大学附属南平市第一医院内分泌科医师，医学硕士，目前主持福建省科学自然基金一项，擅长于糖尿病、甲状腺疾病、肾上腺疾病、垂体疾病、肥胖症等内分泌与代谢疾病的诊治。

参考资料：Shafiya Rafiqi，Shahnawaz Imam，Juan Carlos Jaume，et al. Cellular Immunotheraphy For Type 1 Diabetes Treatment.2023ENDO.