髓系动态 | WT1突变在AML患者中的临床意义：解析其预后和治疗缓解的关系

髓系动态栏目专注于汇总髓系血液疾病最新进展，包括骨髓增生异常综合征（MDS）、急性髓系白血病（AML）、慢性髓系白血病（CML）、真性红细胞增多症（PV）、原发性骨髓纤维化（pMF）、肥大细胞增多症等疾病。髓系动态第二期为大家带来伴WT1突变AML患者的研究进展。

AML是一种遗传异质性疾病，体细胞突变的累积导致了不受控制的细胞增殖和分化。WT1基因位于染色体11p13，在发育、组织稳态和疾病中起重要作用。多项研究提示，WT1高表达与AML患者的预后和复发显著相关，对指导AML治疗具有重要的临床价值。

本期要点：

WT1高表达伴CD58低表达可能是CN-AML患者危险分层的潜在生物标志物

伴WT1突变AML患者可采用基于氟达拉滨的诱导治疗

WT1高表达预示细胞遗传学高危AML患者诱导化疗失败。

allo-HSCT后第60天WT1表达是复发的一个重要预测因素，尤其是在CD34+选择的骨髓细胞上进行检测时

WT1高表达伴CD58低表达可能是细胞遗传学正常AML患者风险分层的生物标志物^[1]

诊断时的细胞遗传学是成人AML最重要的预后因素，然而近50%的正常细胞遗传学AML（CN-AML）患者没有进行有效的风险分层。因此，暨南大学血液病研究所李扬秋教授及其团队探索了潜在的生物标志物来进一步定义CN-AML患者的危险分层。

该研究使用了基因表达综合数据库中的两个数据集，分别是GSE12417-GPL96和GSE71014-GPL10558。对163例GSE12417-GPL96数据集中的CN-AML患者和104例GSE71014-GPL10558数据集中的CN-AML患者的转录组数据进行了OS分析和验证。

研究结果显示，WT1和CD58联合检测可预测CN-AML患者的预后。WT1高表达和CD58低表达与CN-AML患者的不良预后相关。当同时使用WT1和CD58预测OS时，CN-AML患者被分为3组：低危组，WT1^lowCD58^high；中危组，WT1^highCD58^high或WT1^lowCD58^low；高危组，WT1^highCD58^low。中高危患者生存时间更短，OS更差。WT1高表达伴CD58低表达可能是CN-AML患者危险分层的潜在生物标志物。此外，利用WT1和CD58构建的列线图模型可个体化预测CN-AML患者的1、2、3、4、5年OS率。

WT1突变AML对以氟达拉滨为基础的化疗和预处理方案敏感^[2]

美国研究者进行了一项回顾性分析，研究对象为接受异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）的WT1突变AML患者。该研究共纳入37例WT1突变AML患者。患者的初始诱导失败率为40%，经过伊达比星/阿糖胞苷（7+3）方案化疗后早期复发率为18%，所有诱导失败的患者在后续化疗中均获得完全缓解（CR）。清髓性和减低强度（氟达拉滨/马法兰[Flu/Mel]）预处理方案的结局没有显示出显著差异。在移植前接受氟达拉滨+阿糖胞苷+伊达比星+粒细胞集落刺激因子（FLAG-IDA）和/或含氟达拉滨的预处理的患者中，无复发生存期（RFS）显著较好，但总生存期（OS）没有显著改善。在一项独立的体外研究中，与非WT1突变AML样本相比，WT1突变AML样本对氟达拉滨（p=0.026）和马法兰（p=0.0005）的敏感性更高，而对阿糖胞苷的敏感性没有显示出差异。因此，这项研究数据支持对伴有WT1突变AML采用基于氟达拉滨的诱导治疗，而不是7+3方案。氟达拉滨预处理方案用于allo-HSCT显示出较好的RFS，但未显示出较好的OS。

WT1高表达预示细胞遗传学高危AML患者诱导化疗失败^[3]

北京大学人民医院秦亚溱教授及其团队开展了一项研究，探索了初诊时WT1表达在AML中的预后意义。该研究纳入了437例连续的细胞遗传学高危成人AML患者。所有患者确诊时均采用实时荧光定量PCR检测WT1转录本水平；同时检测AML相关常见融合基因、KMT2A-PTD、FLT3-ITD、NPM1、CEBPA和TP53突变。92.4%的患者骨髓WT1过表达。FLT3-ITD、NPM1突变及CEBPA双等位基因突变缺失与WT1高表达显著相关。通过获得CR情况进行受试者特征曲线分析，确定WT1的临界值，并将患者分为WT1低表达组（WT1-L）和WT1高表达组（WT1-H）。在整个队列中，WT1-H与较低的1个疗程和2个疗程CR率显著相关（P<0.0010和P=0.0060），但与RFS无关。多因素分析显示，WT1-H是1个疗程和2个疗程CR的独立不良预后因素。亚组分析显示，WT1-H对中危组、高危组、ELN定义的中危组、正常核型组、KMT2A重排组、FAB-M2组、FAB-M5组和NPM1突变（+）组的CR率有显著影响，而对ELN定义的低危组、ELN定义的高危组、FAB-M4组、FLT3-ITD突变（+）和CEBPA双等位基因突变（+）组的CR率无显著影响。此外，在FAB-M5和KMT2A重排亚组中，WT1-H患者的RFS率均显著低于WT1-L患者（P=0.010和P=0.028），而在上述其他亚组中，WT1对RFS率均无影响（均P>0.05）。因此，初诊时WT1高表达是细胞遗传学高危AML患者诱导化疗失败的独立预测因素，仅与FAB-M5和KMT2A重排患者的复发相关。

allo-HSCT后，CD34+选择的骨髓细胞中第60天的WT1可预测AML患者的复发和死亡率^[4]

意大利的研究者探讨了AML患者接受allo-HSCT后WT1表达的意义，对移植后60天达到CR的50例患者的骨髓细胞中WT1的表达进行了研究分析。在未分离的骨髓单核细胞（MNC）和CD34+选择细胞（CD34+）上评估WT1。ROC曲线分析显示，CD34+细胞的WT1拷贝数为800，是预测复发的最佳临界值（AUC 0.842，p=0.0006，敏感度为85.7%，特异度为81.6%），MNC的WT1拷贝数为100（AUC 0.819，p=0.007，敏感度为83.3%，特异度为88.2%）。

CD34+细胞的WT1拷贝数为800时，2年累积复发率为12% vs 38%（p=0.005），2年生存率为88% vs 55%（p=0.02）。当WT1拷贝数为100时，2年累积复发率为13% vs 44%（p=0.01），2年生存率为88% vs 55%（p=0.08）。

在多变量Cox分析中，CD34细胞中WT1的表达被证明是高度预测复发的因素（p=0.004）；在未分离细胞中WT1的表达也可以预测复发（p=0.03）。总之，allo-HSCT后第60天WT1表达是复发的一个重要预测因素，尤其是在CD34+选择的骨髓细胞上进行检测时。

小编点评：

以上研究结果表明，WT1基因在AML患者中的表达水平与预后有关。高表达的WT1与不良预后和化疗失败相关，而低表达的WT1与较好的预后相关。此外，这些研究还发现WT1与其他遗传突变，如CD58、FLT3-ITD、NPM1等的表达存在相关性。因此，这些研究为AML患者的风险分层和个体化治疗提供了新的生物标志物和指导。然而，仍需进一步开展研究来验证这些生物标志物的可靠性和临床应用性。